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熒光定量PCR儀的基本原理及結(jié)構(gòu)組成

更新時(shí)間:2025-10-29點(diǎn)擊次數(shù):222

  萊恩德LD-P16熒光定量PCR儀主要用于運(yùn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),通過(guò)熒光激發(fā)和采集的方式,對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控,將實(shí)驗(yàn)過(guò)程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線(xiàn),實(shí)時(shí)呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合和分析,最后可生成PDF格式的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

  一、基本原理

  聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA擴(kuò)增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn),是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地?cái)U(kuò)增上百萬(wàn)倍,從而大大提高對(duì)DNA分子的分析和檢測(cè)能力。

  實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針,在PCR反應(yīng)過(guò)程中通過(guò)熒光信號(hào)變化,對(duì)整個(gè)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過(guò)內(nèi)參或外參的方法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。

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  二、儀器結(jié)構(gòu)

  萊恩德熒光定量PCR儀是實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng)的儀器,主要由基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。其中兩個(gè)核心功能模塊:熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)。其中基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴(kuò)增儀工作原理基本相同,采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過(guò)程。熒光檢測(cè)系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號(hào)傳輸部件、熒光檢測(cè)部件、控制系統(tǒng)組成。

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